产品货号:
MT0237
中文名称:
病毒核酸提取试剂盒
英文名称:
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒可以快速可靠的从血清、血浆、拭子、尿液、痰液、动物组织、培养细胞中快速提取病毒及宿主的DNA和RNA,整个用时在5min内完成。提取效率高(最高可获得20μg以上的总产量)。应用本试剂盒提取的DNA、RNA可直接用于限制性酶切反应、PCR、文库构建、Southern杂交等多种分子生物学实验。
组分 | 规格 |
gDNA BP22 | 15mL |
gDNA CP32 | 8mL |
Washing Buffer | 55mL |
DNA Elution Buffer | 10mL |
吸附柱芯(NP05) | 50套 |
2mL吸附柱外套管 | 50套 |
1.5mL收集管 | 50套 |
保存:室温,避光,有效期1年。
异丙醇
- Washing Buffer中已经加乙醇,无需单独添加。
- gDNA BP22与gDNA CP32溶液有强烈的腐蚀性,使用时务必做好防护,防止灼伤皮肤和眼睛。如有发生,立即用大量的清水冲洗,并就医。
- 整套吸附柱的准备:提前将吸附柱芯放入到2mL吸附柱外套管中,待用。
为标准化操作步骤的建立,推荐将组织、细胞等样本做成液体悬液进行后续操作。
- 液体类型的样本(包括:血清、血浆、细胞上清液、
拭子液、尿液、痰液、灌洗液)可以直接取150μL用于提取。 - 动物组织:将组织放入ddH2O或PBS中进行研磨,使组织的浓度在20~100mg/mL。取150μL组织悬液(或离心后的病毒上清液)用于后续提取。
- 感染的培养细胞样本:将104-7个感染细胞重悬于150μL的ddH2O中用于后续提取。
- 在1.5mL EP管中加入300μL的gDNA BP22溶液,并加入150μL的液体悬液样本(样品不足150μL时,用ddH2O补足)。用旋涡混合仪,剧烈旋涡混合10s。
- 打开管盖,向溶液中加入150μL的gDNA CP32溶液,用旋涡混合仪,剧烈旋涡混合10s。
- 将1.5mL EP管放入离心机,13000rpm离心1~2min。此时,样本中的蛋白会紧密的贴合沉淀在EP管底部。将上清液(约500μL)直接倒入到整套吸附柱芯中。
- 勿将蛋白沉淀倒入,并保持吸附柱管盖处于打开状态。
- 向吸附柱芯的溶液中,加入250μL的异丙醇(此时总体积约750μL),盖上吸附柱管盖,上下混合2~3次。
- 此步骤务必将异丙醇与上清液混合均匀后,再进行后续离心,否则会导致提取效率下降。
- 将吸附柱放入离心机中,13000rpm离心10s,倒掉下层外套管中的过柱液,此时核酸已经吸附在柱芯上。
- 向吸附柱芯中加入500μL Washing Buffer,盖上管盖,并上下混合2~3次,进行柱芯洗涤。13000rpm离心10s,倒掉下层外套管中的废液。并重复此洗涤步骤一次,倒掉下层外套管中的废液。
- 将吸附柱重新放回离心机,13000rpm空离心2min,将残留的乙醇彻底甩干。
- 将吸附柱芯从2mL吸附柱外套管中取出,放入到新的1.5mL收集管中,向吸附柱芯中加入50~60μL DNA Elution Buffer,13000rpm离心30s,洗脱液即为DNA和RNA,冷冻保存。
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